Überexpression der Lipase aus \(\textit {Pseudomonas aeruginosa}\) und physiologische Charakterisierung der Foldasefunktion

  • \(\textit {P. aeruginosa}\) sekretiert die Lipasen LipA und LipC. Sie benötigen zur Faltung den Faltungshelfer LipH. Die Lipase LipA ist ein Virulenzfaktor und Biokatalysator. Im nichtpathogenen Stamm \(\textit {P. putida}\) wurde ein System zur Produktion aktiver, sekretierter Lipase entwickelt. Die Xcp-Proteine aus \(\textit {P. aeruginosa}\) konnten im heterologen Wirt einen Exportapparat aufbauen. Im homologen Wirt wurden Stämme konstruiert, die unter Verwendung einer induzierbaren T7-RNA-Polymerase die Überproduktion von Lipase zulassen. Das seltene GTG-Startkodon wirkt limitierend auf die LipH-Expression. Die LipH-Menge in der Zelle ist limitierend für die Lipaseproduktion. Die Überexpression von LipH steigert im Wildtyp die Lipaseproduktion. Diese Steigerung wirkt posttranskriptionell, essentiell hierfür ist der untranslatierte mRNA-Bereich. Die LipH-Verankerung in der Membran ist nur für die Produktion von LipC essentiell. Die regulatorische Funktion von LipH bedarf der Membranlokalisierung.

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Metadaten
Author:Frank RosenauGND
URN:urn:nbn:de:hbz:294-9636
Referee:Karl-Erich JägerGND, Matthias RögnerGND
Document Type:Doctoral Thesis
Language:German
Date of Publication (online):2004/01/14
Date of first Publication:2004/01/14
Publishing Institution:Ruhr-Universität Bochum, Universitätsbibliothek
Granting Institution:Ruhr-Universität Bochum, Fakultät für Biologie und Biotechnologie
Date of final exam:2001/01/14
Creating Corporation:Fakultät für Biologie und Biotechnologie
GND-Keyword:Triacylglycerollipase; EC 3.1.1.3; Proteinfaltung; Chaperonine; Operon.
Institutes/Facilities:Lehrstuhl für Biologie der Mikroorganismen
Dewey Decimal Classification:Naturwissenschaften und Mathematik / Biowissenschaften, Biologie, Biochemie
faculties:Fakultät für Biologie und Biotechnologie
Licence (German):License LogoKeine Creative Commons Lizenz - es gelten der Veröffentlichungsvertrag und das deutsche Urheberrecht