Intronunabhängige Expression des Glykoproteins G des \(\it Vesicular\)-Stomatitis-Virus zur Pseudotypisierung lentiviraler Vektoren

  • Ausgangspunkt der vorliegenden Arbeit war die Notwendigkeit einer aus dem Exon 1, dem ersten Intron und dem 5'-Ende des Exons 2 der HCMV-MIE-Gene bestehenden Sequenz zwischen HCMV-MIE-Promotor und der für VSV-G codierenden Sequenz in dem VSV-G-Expressionsplasmid für die Pseudotypisierung lentiviraler Vektoren. Erstmals beschrieben wird hier eine Sequenz, die als RNA vermutlich eine \(\it Stemloop\)-Struktur bildet und aus dem 3'-Ende des HCMV-MIE-Exons 1 und dem 5'-Ende des Exons 2 besteht. Darüber hinaus ist ein bisher nicht beschriebenes optionales Exon im ersten HCMV-MIE-Intron aufgefallen. Die Expression einer codonoptimierten VSV-G-Sequenz zur Pseudotypisierung lentiviraler Vektoren führt in der vorliegenden Arbeit zur völligen Entbehrlichkeit von HCMV-Sequenzen in der 5'-UTR. Die Codonoptimierung wirkt hier auf Prätranslationsebene. Eine absolute Steigerung der Titer VSV-G-pseudotypisierter lentiviraler Vektoren kann aufgrund der Cytotoxizität des VSV-G nicht erreicht werden.

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Metadaten
Author:Daniela Stefanou
URN:urn:nbn:de:hbz:294-17110
Referee:Klaus Thomas ÜberlaGND, Bernd-Joachim BeneckeGND
Document Type:Doctoral Thesis
Language:German
Date of Publication (online):2006/08/31
Date of first Publication:2006/08/31
Publishing Institution:Ruhr-Universität Bochum, Universitätsbibliothek
Granting Institution:Ruhr-Universität Bochum, Fakultät für Chemie und Biochemie
Date of final exam:2006/07/18
Creating Corporation:Fakultät für Chemie und Biochemie
GND-Keyword:Genregulation; Codon; Spleißen; Gentherapie; RNS (Sekundärstruktur)
Dewey Decimal Classification:Naturwissenschaften und Mathematik / Biowissenschaften, Biologie, Biochemie
Licence (German):License LogoKeine Creative Commons Lizenz - es gelten der Veröffentlichungsvertrag und das deutsche Urheberrecht

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