Untersuchungen zur transienten Wechselwirkung von RNA und Proteinkomplexen

In dieser Arbeit wurde ein Protein identifiziert, welches einen spezifischen Komplex mit der Teilsequenz L2-RNA ausbildet. Mit Hilfe von UV-RNA-Protein-Crosslink-Experimenten konnte ein 20-kDa-Protein in partiell gereinigtem HeLa-Kernextrakt identifiziert werden. Dieses Protein wurde chromatographisch bis zur Homogenität aufgereinigt, die Identität massenspektrometrisch festgestellt und die cDNA (p20.1) kloniert. Durch die Einführung von Mutationen, die sowohl die putative Sekundärstruktur stören, als auch die Sequenz verändern, konnte die Spezifität dieser Protein-RNA-Interaktion mit Gelretardationsanalysen gezeigt werden. Die Ergebnisse wurden mit affinitätsgereinigem, in HeLa-Zellen rekombinant hergestelltem p20.1 verifiziert. Durch Immunopräzipitation wurden in vitro Komplexe mit der L2-RNA und rekombinantem Protein nachgewiesen.

Metadaten
Author:	Thomas Wegert
URN:	urn:nbn:de:hbz:294-14325
Referee:	Bernd-Joachim Benecke GND, S. Müller, Wolfgang Schuhmann ORCiD GND
Document Type:	Doctoral Thesis
Language:	German
Date of Publication (online):	2005/09/07
Date of first Publication:	2005/09/07
Publishing Institution:	Ruhr-Universität Bochum, Universitätsbibliothek
Granting Institution:	Ruhr-Universität Bochum, Fakultät für Chemie und Biochemie
Date of final exam:	2005/05/11
Creating Corporation:	Fakultät für Chemie und Biochemie
GND-Keyword:	Small nuclear RNA; RNS-Bindeproteine; EMSA; Affinitätschromatographie
Institutes/Facilities:	Lehrstuhl Biochemie I, Rezeptorbiochemie
Dewey Decimal Classification:	Naturwissenschaften und Mathematik / Biowissenschaften, Biologie, Biochemie
Licence (German):	Keine Creative Commons Lizenz - es gelten der Veröffentlichungsvertrag und das deutsche Urheberrecht

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