Die Rolle der Thiol-Disulfid-Oxidoreduktasen DsbA und DsbC bei der Proteinsekretion in Pseudomonas aeruginosa

  • Die Arbeit untersucht, ob das Gram-negative Bakterium Pseudomonas aeruginosa eine funktionelle Thiol-Disulfid-Oxidoreduktase DsbA bildet, und ob diese an der Proteinsekretion beteiligt ist. Ein dsbA-homologes Gen aus P. aeruginosa wurde in E. coli überexpremiert und das Genprodukt gereinigt. Die katalytische Aktivität von DsbA konnte nachgewiesen und ein Cys-X-X-Cys-Motiv als katalytisches Zentrum identifiziert werden. DsbA ist im Periplasma der P. aeruginosa-Zelle lokalisiert und wird konstitutiv gebildet. In einer dsbA-Deletionsmutante ist die extrazelluläre Lipaseaktivität stark reduziert. Durch eine zusätzliche Inaktivierung des dsbC-Gens wurde die Lipaseaktivität so weit reduziert, daß sie der einer sekretionsdefizienten Mutante entsprach. Mit Hilfe einer Cys-X-X-Ser-Variante von DsbA konnte ein DsbA-Lipase-Komplex im Periplasma nachgewiesen und damit gezeigt werden, daß DsbA während des Sekretionsprozesses als direkter Donor für die Disulfidbrücke der Lipase fungiert.

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Metadaten
Author:Andreas Urban
URN:urn:nbn:de:hbz:294-1148
Referee:Karl-Erich JägerGND, Wolf-Hubert KunauGND
Document Type:Doctoral Thesis
Language:German
Date of Publication (online):2003/03/18
Date of first Publication:2003/03/18
Publishing Institution:Ruhr-Universität Bochum, Universitätsbibliothek
Granting Institution:Ruhr-Universität Bochum, Fakultät für Biologie und Biotechnologie
Date of final exam:2000/06/27
Creating Corporation:Fakultät für Biologie und Biotechnologie
GND-Keyword:Pseudomonas aeruginosa; Thiol-Disulfid-Oxidoreduktase; Disulfidbrücke; Proteinsekretion
Dewey Decimal Classification:Naturwissenschaften und Mathematik / Biowissenschaften, Biologie, Biochemie
Licence (German):License LogoKeine Creative Commons Lizenz - es gelten der Veröffentlichungsvertrag und das deutsche Urheberrecht

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