Funktionelle und strukturelle Charakterisierung von Ras-Effektoren

  • Die Ras-Bindungsdomäne (RBD) von Nore1 ist mit 160° Aminosäuren die bisher größte bekannte RBD. Durch Modellierungen von Nore1-RBD mit RalGDS-RBD als Vorlage wurden Mutationskandidaten identifiziert, die durch Punktmutationen im Vergleich mit anderen RBD’s charakterisiert wurden. Die Nore1-RBD kristallisierte als K302D-Mutante mit Ras (1-166) GppNHp (D30E/E31K). Es wurden sehr gute (2,5 AA Auflösung) und vollständige Datensätze gesammelt. \(\textit {In vitro}\) wurde für zwei mögliche Interaktionspartner von Nore1 die Bindung quantifiziert. So binden MSS4 (Austauschfaktor von Rab3a) und Map1B (microtubulusassoziiertes Protein des Cytoskeletts) an die Nore1-RBD. Die Coiled Coil-Domäne (CC) von Nore1 wurde kristallisiert und die Struktur röntgenkristallographisch gelöst. Es ergab sich ein antiparalleles linksgängiges CC-Supercoildimer. Durch ITC-Messungen konnte die Komplexbildungskonstante bestimmt werden. Ein Modell zur Aktivierung einer S/T-Kinase (MST1) durch Nore1-CC wurde aufgestellt.

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Metadaten
Author:Daniel Schwarz
URN:urn:nbn:de:hbz:294-7106
Subtitle (German):Eigenschaften des kleinen Ras-Effektors Novel Ras Effector 1 (Nore1)
Referee:Alfred WittinghoferGND, Andrea BlöchlGND
Document Type:Doctoral Thesis
Language:German
Date of Publication (online):2003/04/14
Date of first Publication:2003/04/14
Publishing Institution:Ruhr-Universität Bochum, Universitätsbibliothek
Granting Institution:Ruhr-Universität Bochum, Fakultät für Chemie und Biochemie
Date of final exam:2003/02/11
Creating Corporation:Fakultät für Chemie und Biochemie
GND-Keyword:Apoptosis; Yeast-Two-Hybrid-System; Isothermes Kalorimeter / Titration; Helix-Knäuel-Umwandlung; Protein-Serin-Threonin-Kinasen
Dewey Decimal Classification:Naturwissenschaften und Mathematik / Chemie, Kristallographie, Mineralogie
Licence (German):License LogoKeine Creative Commons Lizenz - es gelten der Veröffentlichungsvertrag und das deutsche Urheberrecht