Untersuchung der Proteinalterung am Beispiel des \(\alpha\)A-Crystallins der Augenlinse mittels proteomanalytischer Methoden
- Die Augenlinse eignet sich ausgezeichnet als Modell zur Untersuchung der Proteinalterung, da die enthaltenen Proteine während des gesamten Lebens erhalten bleiben. Innerhalb dieser Arbeit wurden Augenlinsen von Mäusen vier verschiedener Altersstufen für die Analysen verwendet. Anhand des \(\alpha\)A-Crystallins, einem der Hauptstrukturproteine, wurde die Veränderung des Proteinmusters während der Alterung nach der Proteintrennung mittels 2D-PAGE untersucht. Neben der Proteinidentifizierung stand die Lokalisation von posttranslationalen Modifikationen (PTMs) durch nanoLC-MS/MS-Analysen im Mittelpunkt. Zur Ergänzung der MS-Resultate wurden Re-2D-PAGE-Analysen durchgeführt und Detektionsmethoden zum Nachweis spezifischer Proteinisoformen verwendet (Immunodetektion und ProQ Diamond Phosphostain). Durch die Kombination der Methoden konnte das komplexe Spotmuster der \(\alpha\)A-Crystalline durch das Auftreten von PTMs, limitierter C-terminaler Proteolyse und artifizieller Spots vollständig erklärt werden.
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| Author: | Heike SchäferGND |
|---|---|
| URN: | urn:nbn:de:hbz:294-11187 |
| Referee: | Helmut E. MeyerGND, Andrea BlöchlGND |
| Document Type: | Doctoral Thesis |
| Language: | German |
| Date of Publication (online): | 2004/08/22 |
| Date of first Publication: | 2004/08/22 |
| Publishing Institution: | Ruhr-Universität Bochum, Universitätsbibliothek |
| Granting Institution: | Ruhr-Universität Bochum, Fakultät für Chemie und Biochemie |
| Date of final exam: | 2004/07/19 |
| Creating Corporation: | Fakultät für Chemie und Biochemie |
| GND-Keyword: | Augenlinse; Posttranslationale Änderung; Phosphorylierung; LC-MS; Bioinformatik |
| Institutes/Facilities: | Medizinisches Proteom-Center |
| Dewey Decimal Classification: | Naturwissenschaften und Mathematik / Biowissenschaften, Biologie, Biochemie |
| faculties: | Fakultät für Chemie und Biochemie |
| Licence (German): |  Keine Creative Commons Lizenz - es gelten der Veröffentlichungsvertrag und das deutsche Urheberrecht |
