Development of a multi-copy bead display approach and its application in \(\textit {in vitro}\) evolution of proteins and nucleic acids

In vitro Evolution ist ein leistungsfähiges Werkzeug, um Eigenschaften von Nukleinsäuren oder Proteinen zu optimieren. Die bisher erfolgreichste Plattform ist das phage display. Mit dem Auftauchen von ausschließlich in vitro-basierten Systemen wie Ribosomendisplay und covalent DNA display entstand jedoch eine Tendenz, zellfreie Evolutionssysteme zu verwenden, begründet durch die höhere mögliche Komplexität der einsetzbaren Bibliotheken. Einige dieser Techniken sind jedoch speziell auf bestimmte Anwendungen zugeschnitten und deshalb nicht universell einsetzbar. Deshalb wurde ein neuartiges Multicopy Bead Display-Verfahren für die in vitro Evolution von Nukleinsäuren und Proteinen entwickelt. Als Test konnte aus einer randomisierten Bibliothek für den T7 Promoter erfolgreich eine Promotorvariante identifiziert werden, die sich durch eine 10-fach erhöhte Transkriptionsaktivität und 2-fach erhöhte Proteinexpressionslevel auszeichnete.

Metadaten
Author:	Siddhartha Paul GND
URN:	urn:nbn:de:hbz:294-36026
Referee:	Klaus Thomas Überla GND, Christian Herrmann ORCiD GND
Document Type:	Doctoral Thesis
Language:	English
Date of Publication (online):	2013/01/02
Date of first Publication:	2013/01/02
Publishing Institution:	Ruhr-Universität Bochum, Universitätsbibliothek
Granting Institution:	Ruhr-Universität Bochum, Fakultät für Chemie und Biochemie
Date of final exam:	2012/11/23
Creating Corporation:	Fakultät für Chemie und Biochemie
GND-Keyword:	Gerichtete Evolution; Phagen-Display-Bibliothek; Polymerase-Kettenreaktion; Promoter; Ribosom
Dewey Decimal Classification:	Naturwissenschaften und Mathematik / Chemie, Kristallographie, Mineralogie
faculties:	Fakultät für Chemie und Biochemie
Licence (German):	Keine Creative Commons Lizenz - es gelten der Veröffentlichungsvertrag und das deutsche Urheberrecht

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